CEC

Capillary Electrochromatography, CEC

ELEKTROCHROMATOGRAFIE (EC, CEC)

Separační kapilára je naplněna stacionární fází.
Mobilní fáze je hnána pomocí elektroosmózy.
EOF je generován větší měrou na povrchu stacionární fáze než na vnitřním povrchu kapiláry.
Separace nenabitých analytů je způsobena jejich rozdílnou distribucí mezi sorbentem a eluentem.
Separace nabitých analytů je navíc ještě podporována jejich rozdíly v elektroforetických mobilitách.

VÝHODY A NEVÝHODY CEC

Výhody
1. rovný rychlostní profil EOF: 1–3×10⁵ pater / 1 m (tj. 3 až 4 krát větší účinnost než v HPLC)
2. žádné velké tlaky
3. možnost velmi malých částic
4. neutrální, lipofilní a ve vodě nerozpustné analyty
5. malá spotřeba vzorku a mobilní fáze
6. isokratická a gradientová eluce
7. možnost použití MS detekce
8. jednotný přístroj pro CZE, CEC a CLC

Nevýhody
1. příprava naplněných kapilár, frity
2. křehkost naplněných kapilár
3. bubliny (rozdíly v EOF, Jouleovo teplo)
4. elektrokinetické dávkování (interní standard)
6. menší citlivost

SEPARAČNÍ KOLONA pro CEC

I.D. : 50 μm, 75 μm a 100 μm

LEPENÁ SEPARAČNÍ KOLONA pro CEC

STACIONÁRNÍ FÁZE v CEC

částice náplně 3 μm a 5 μm

ODS, C18 navázány na silikagelu (reversní)
β-CD navázán na silikagelu (chirální)
SCX kationtový iontoměnič (-CH₂CH₂CH₂SO₃H)

APLIKACE CEC

léčiva :
     - nečistoty
     - chirální separace
     - hlavní komponenta
     - zásaditá farmaka (na SCX)

polyaromatické uhlovodíky (PAH)

benzeny a chlorbenzeny

textilní barviva

CEC-LIF : polyaromatické uhlovodíky

75 μm ID × 365 μm OD, 33 cm naplněná kapilára
3 μm ODS (90 %) a 1 μm silikagel (10 %)
80 % acetonitril a 4 mM tetraboritan sodný
separační napětí : 15 kV
dávkování : 5 kV / 5 s

píky :
1 naftalen, 2 acenaftylen, 3 acenaften a fluoren,4 fenanthren, 5 anthracen, 6 fluoranthen, 7 pyren,
8 benz[a]anthracen, 9 chrysen, 10 benzo[b]fluoranthen, 11 benzo[k]fluoranthen, 12 benzo[a]pyren,
13 dibenz[a,h]anthracen, 14 benzo[ghi]perylen,15 indeno[1,2,3-cd]pyren

CEC : kyselá léčiva

50 μm i.d. × 210 mm naplněná kapilára
3 μm Hypersil C18 a 3 μm Hypersil C18/SCX
CH₃CN / NaH₂PO₄ (50 mM) / H₂O 60:20:20 v/v/v
separační napětí : 30 kV
tlak : 8 bar
dávkování : 5 kV / 15 s
detekce : DAD 210 nm

píky : 1 p-hydroxybenzoová kyselina, 2 bumetanid, 3 flurbiprofen

soubor pdf: cec.pdf